在阻塞的小鼠shen脏中,内皮功能障碍通过增强成纤维细胞Smad3连接蛋白磷酸化而加剧shen间质纤维化。
II型胶原抗体orb156420 PubMed 27956350生命科学
脾切除大鼠骨0折愈合延迟。
II型胶原抗体orb221349 PubMed 27647680细胞增殖
PCL-PEG-PCL膜在体内促进软0骨再生。
在创伤修复和再生的活0体猪模型中,使用微载体输送角质形成细胞和成纤维细胞可显著减少伤口收缩。
条带拖尾
1. 原因:蛋白量太大,一抗浓度偏高和孵育时间太长;
2. 优化:根据实验需求调整上样蛋白量,调整一抗浓度和时间;
3. 解析:这种情况也是常见问题,上样蛋白量一般会做预实验避免;还有容易发生的是一抗浓度太高,作用时间太长引起的,品牌一抗都有稀释比例建议;再个质量好的一抗直接37度孵育半小时就好,无需孵育过夜;再强调一遍洗膜千万不要偷懒,次数和时间洗到位,不要担心把抗体和蛋白洗掉没那么脆弱。
条带中间出现白斑点
1. 原因:底物消耗过快,中间区底物消耗完不发光了;
2. 优化:降低蛋白量,降低一抗和二抗的浓度;
3. 解析:快速操作,在中间部位底物消耗之前就把胶光片定影出来,一般实验员很难把控制;首0选从降低蛋白量,降低一抗二抗浓度入手。
出现黑点
1. 原因:膜上其他部位与一抗或者二抗非特异性结合;
2. 优化:封闭用的牛奶一定要纯并且完全溶解,封闭后至少洗膜一次;
3. 解析:确定封闭牛奶完全溶解,否则封闭时会导致不溶性颗粒附着在膜上,在发光时膜上会出现黑点;建议在牛奶溶解之后静止三分钟,GALT 兔多抗,轻取上层牛奶液进行封闭,封闭结束常规洗膜一次;孵育一抗或二抗时,需要加牛奶的也请参照此操作。
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