结果计算
样品中cAMP浓度有多种计算方法。X轴表示cAMP标准品浓度,Y轴表示净光密度的平均值或者百分比值。
1 样品和标准品的净光密度(OD)平均值的计算:
净OD平均值 = OD平均值 - NSB孔OD平均值
2 计算不同梯度浓度标准品的结合率占较大结合率(B0孔)的百分比,计算公式 如下:
百分比值 = (净OD平均值/ B0孔OD平均值)×100
3 绘制净OD平均值或百分比值对cAMP标准品浓度的Logit-Log曲线。通过插值即可得到样品中cAMP浓度。
武汉纽斯特生物科技有限公司(WuhanNewEastBiotechonologyCo.Ltd),系美国生命科学试剂供应商美国NewEastBio在中国的子公司。公司位于武汉东湖高新技术开发区光谷生物城.美国NewEastBio专注于生命科学和生物技术领域,主要产品有小分子、ELISA试剂盒、蛋白等,与世界高校和研究所、世界大制药公司、生物科技公司和医院等客户建立了长期稳定的合作关系,产品销往世界。
标准品制备
用1.0 mL通用稀释液重新配制标准溶液,Mouse cAMP kit,在室内保存10分钟
温度,轻轻摇动(不要起泡)。标准品在原料中的浓度
溶液为20 ng/mL。请准备7支含有0.5 mL通用稀释剂的试管
根据下图制作一个双稀释系列。混合每根管子
在下一次转移之前检查。设置7点稀释标准,如20 ng/mL、10 ng/mL、5 ng/mL、2.5 ng/mL、1.25 ng/mL、0.62 ng/mL、0.31 ng/mL,zui后一根EP管
采用通用稀释剂,空白值为0 ng/ml。
灵敏度
通过比较10个B0孔平均光密度值(OD)和10个5号管标准品的平均光密度值,计算出灵敏度。cAMP浓度的检测极限通过标准曲线上0位置的两个标准偏差来测定。
OD(B0平均数) =0.685± 0.003
OD(5号 标准品平均数)=0.604± 0.010
光密度偏差(0-0.4 pmol/mL) =0.081
2 SD"s of the Zero Standard =0.006
灵敏度 =081.0006.0/0.8×0.4 pmol/mL =29.6 fmol/mL
Mouse cAMP kit-武汉纽斯特(推荐商家)由武汉纽斯特生物技术有限公司提供。武汉纽斯特生物技术有限公司为客户提供“G蛋白活性,cAMP和cGMP ELISA试剂盒,蛋白点突变”等业务,公司拥有“纽斯特”等品牌,专注于生物化工等行业。,在湖北省武汉市东湖新技术开发区高新大道666号光谷生物城B3-3栋3楼的名声不错。欢迎来电垂询,联系人:黄经理。