南京英瀚斯生物科技(图)-动物实验外包-绵阳动物实验

小鼠xiao喘模型

造模方法

致敏：小鼠在清洁级实验动物房适应性饲养1周，于造模当天、第8天经腹腔无菌注she抗原液0.2 ml

激发：第二周，每日上午8～10时将小鼠置于自制密闭雾化箱中，实验动物模型公司，给予含10mg/ml卵清蛋白溶液超声雾化吸入(现配现用)，每日1次，每次30min以激发xiao喘，连续激发14-21 d。成功的模型表现：小鼠出现烦躁不安，进而呼吸加快、加深，静伏不动、弓背，严重者伸颈、缩胸、收缩呈喘xi状，甚至大小便失禁等。

造模照片

模型图片

前lie腺素E2对大鼠巨噬细胞株NR8383 合成血管内皮生长因子促进人脐静脉血管内皮细胞成管、迁移的影响

　　方法：分别采用0.1 nmol/L PGE2、1 nmol/L PGE2、1 nmol/L PGE2+10 nmol/L EP2受体抑zhi剂AH6809+10 nmol/L EP4受体抑zhi剂AH23848 处理的NR8383 细胞作为各实验组，选择未经PGE2以及其特异性受体抑zhi剂处理的NR8383 细胞作为对照组，采用Western blot 和qPCR方法检测各组NR8383细胞内VEGF蛋白以及mRNA的表达水平；收集以上各处理组的细胞培养上清液分别刺激1HUVECs，运用TRANSWELL 小室、Matrigel 胶细胞成管实验等实验方法，观察PGE2调控巨噬细胞对HUVEC 迁移效应和成管能力的影响。

　　结果：随着NR8383 细胞培养液中加入PGE2浓度增gao，其 VEGF蛋白表达和VEGF mRNA的表达水平显著升高（P<0.05）；0.1 nmol/L、1 nmol/L PGE2处理过的NR8383细胞培养上清液可以显著增加HUVEC细胞形成的小管面积，形成小管面积随着PGE2处理浓度的增加而增加（P<0.05）；HUVECs的迁移运动也随着PGE2处理浓度的升高不同程度的增强，HUVECs趋化的数量显著升高（P<0.05）；研究发现PGE2特异性的EP2/EP4 受体拮抗剂AH6809/AH23848，可以显著抑制PGE2 增强NR8383 细胞内VEGF mRNAs 表达的作用并且也显著抑制PGE2 增强 NR8383细胞促进HUVECs成管和趋化能力的效应（P<0.05）。

大动脉转位致紫绀型心脏病动物模型

【造模方法】  体重为1.5～2.0kg雄性新西兰兔，按30mg/kg体重的剂量经耳缘静脉注she硫喷妥钠麻l醉，然后每隔30min静脉注she3～5mg/kg体重的剂量维持麻l醉。动物行仰卧位固定，前胸部皮肤常规去毛后消毒，作前正中无菌手术切口，切开皮肤、皮下组织及肌层，于第6、第7肋间水平横断胸骨，延正中线向上剪开胸骨，撑开器撑开，剪开心包，暴露心脏，注意保持纵隔胸膜的完整。游离肺动脉后，用4号丝线双活结结扎左心耳根部以阻断血流，于左心耳内注入1％肝素，可以做动物实验的公司，用侧壁钳钳夹肺动脉左侧壁，在与左心耳对应部位剪开4～5mm的切口，用8/0的无损伤尼龙缝合线将肺动脉与左心耳侧侧吻合，先连续外翻缝合后壁，再间断外翻缝合前壁。缝线打结前排尽空气，先松开左心耳根部的结扎线，再缓慢松开肺动脉上的侧壁钳。生理盐水冲洗胸腔，置入硅胶引流片，关胸。术后每日肌肉注she青l霉l素40万U以预防感l染，共5d，术后3d拔取引流条。手术当中观察左心耳的颜色变化。于术后第4周，麻l醉，经腹l股l沟处切口l，l暴露股动脉，抽血测定pH值、氧分压(PO2)、二氧化碳分压(PCO2)、氧饱和度(SaO2)、血红蛋白含量(Hb)、红细胞比容(Hct)。采血后处死动物，观察心脏及吻合情况。术中吻合完成时可见左心耳颜色明显变暗，术后4周处死动物可见双心室轻度扩大，以右心室明显，吻合口通畅，直径为3～4mm，吻合口处光滑。术后1周动物的PO2、SaO2明显降低。术后第4周，动物实验外包，PO2和SaO2的降低程度有所减小，考虑是代偿的原因。注意吻合口的大小要严格控制在4～5mm，绵阳动物实验，太大时，严重的低氧会造成动物早期死l亡；太小时，有不能满足实验的要求，且容易形成血l栓而堵塞吻合口。