溶质在反相介质上的分配系数取决于溶质的疏水性，一般疏水性越大，分配系数越大。当固定相一定时，可以通过调节流动相的组成调整溶质的分配系数。RPC主要应用于相对分子质量低于5000，特别是1000以下的非极性小分子物质的分析和纯化，也可以用于蛋白质等生物大分子的分析和纯化。由于反相介质表面为强烈疏水性，并且流动相为低极性的，生物活性大分子在RPC分离过程中容易变性失活，所以，以回收生物活性蛋白质为目的时，应注意选用适宜的反相介质。
快速液相色谱纯化
使用快速色谱法进行纯化的缺点是该方法固有的分辨率较低。快速液相色谱柱使用更大的粒径和柱容量，waters H-class液相报价，允许使用更多的起始材料，但以分辨率和纯度为代价。如果化合物不需要更高的纯度，或者如果下一步将进行 HPLC，这可能是您的选择。
1、确定溶剂系统
样品的纯度（即混合物中有多少化合物）可以使用薄层色谱法 (TLC) 和组分的相对极性进行定性测定。使用 TLC 预先筛选佳流动相和固定相将节省时间和金钱。根据所使用的溶剂，您可能需要在通风柜中运行色谱柱，因为存在潜在的危险烟雾。
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