TCEP 溶液，0.5M5mL操作步骤对于培养细胞样品：1. 融解 RIPA 裂解液，徐州蛋白还原酶tcep，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入 PMSF， 使 PMSF 的zui终浓度为 1mM。2. 裂解细胞 2.1 对于贴壁细胞：去除培养液，用 PBS、生理盐水或无培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞 1-2 秒后，细胞就会被裂解。 2.2 对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照 6 孔板每孔细胞 加入150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分 裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成 50-100 万细胞/管， 然后再裂解。3. 充分裂解后，10000-14000g 离心 3-5 分钟，取上清，即可进行后续的 PAGE、 Western 和沉淀等操作。 注意：通常 6 孔板每孔细胞加入 150 微升裂解液已经足够，蛋白还原酶tcep生产厂家，但如果细胞密度非常高 可以适当加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
TCEP 溶液，0.5M（一）、煮沸法1、将1.5ml培养液倒入eppendorf管中，4℃下12000ｇ离心30秒。2、弃上清，将管倒置于卫生纸上几分钟，使液体流尽。3、将菌体沉淀悬浮于120ml STET溶液中， 涡旋混匀。4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml)， 涡旋振荡3秒钟。5、将eppendorf管放入沸水浴中，50秒后立即取出。6、用微量离心机4℃下12000g离心10分钟。7、用无菌牙签从eppendorf管中去除细菌碎片。8、取20ml进行电泳检查。
TCEP 溶液，0.5M(TCEP Solution)操作步骤（一）获得目的基因1、通过PCR方法：以含目的基因的质粒为模板，蛋白还原酶tcep哪家好，按基因序列设计一对引物（在上游和下游引物分别引入不同的酶切位点），PCR循环获得所需基因片段。2、通过RT-PCR方法：用TRIzol法从细胞或组织中提取总RNA，以mRNA为模板，逆转录形成cDNA链，以逆转录产物为模板进行PCR循环获得产物。（二）构建重组表达载体1、TCEP 溶液，0.5M(TCEP Solution)载体酶切：将表达质粒用限制性内切酶（同引物的酶切位点）进行双酶切，蛋白还原酶tcep厂家，酶切产物行琼脂糖电泳后，用胶回收Kit或冻融法回收载体大片段。2、PCR产物双酶切后回收，在T4DNA连接酶作用下连接入载体。
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