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按手术有菌或无菌的程度，净化层流手术室，手术间可划分成以下5类：(1)Ⅰ类手术间：即无菌净化手术间，主要接受颅脑、心脏、脏器移植等手术。(2)Ⅱ类手术间：即无菌手术间，手术室净化，主要接受脾切除手术、闭合性切开复位术、眼内手术、甲状腺切除术等无菌手术。(3)Ⅲ类手术间：既有菌手术间，百级手术室净化，接受胃、胆囊、肝、阑尾、、肺等部位的手术。
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（1）进入手术室必须更换洗手衣裤、鞋帽。（2）严格控制入室人数。（3）尽量减少层流手术室的开门次数与时间（更不可将门打开不关），维持"相对密闭状态"，以防外来污染的进入。（4）手术前用酒精擦拭室内物品、程仪器、设备等。（5）术后及时、清洁室内所有物品、墙壁及地面。（6）妇女不可用粉、头发喷雾剂和指甲油之类的化妆品，以减少污染来源。
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层流手术室是采用空气洁净技术对微生物污染采取程度不同的控制，达到控制空间环境中空气洁净度适于各类手术之要求；并提供适宜的温、湿度，创造一个洁净舒适的手术空间环境。由于手术室要严格控制低细菌数及低气体浓度，所以层流超净装置的稳定性是层流净化手术室的重要验收指标。由于欧美手术室洁净标准与中国环境存在细微差别，百级净化手术室，常规的和国内区域行业标准都普遍难于确保手术室净化的长期稳定（一般只能3-10年重建、低档工程1年即需要翻新），所以在工程质量方面出现了明显的档次划分。一些净化工程公司，在通行标准之外，基本都设有自身执行的高于国际化通行标准的净化指标。
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