基因法转化洋葱表皮细胞：
分别用70%乙醇和灭菌蒸馏水清洗金粉（直径为1 μm），加入灭菌蒸馏水制成金粉悬浮液，湖北亚细胞定位，取100 μL 放在含有1.0 cm2 洋葱表皮的玻璃皿中，边振荡边加入10 μL pCambia2301-GaMYB2-GFP质粒，逐步加入40 μL 0.1 mol·L-1 亚精胺和100 μL2.5 mol·L-1 CaCl2，振荡混匀。基因GDS-80轰击时氦气罐的气压为1 300 psi，取10 μL DNA 包裹好的微粒悬浮液加到基因中央，进行轰击，之后放置25℃避光过夜培养，使用ConfocalLaser激光共聚焦显微镜观察。
主要方法
免疫荧光技术：利用抗原与的特异性结合原理，将荧光标记的与细胞内的目标蛋白结合，然后通过荧光显微镜观察荧光信号的位置，从而确定目标蛋白的亚细胞定位。
绿色荧光蛋白（GFP）融合蛋白技术：将绿色荧光蛋白基因与目标蛋白基因融合，构建成融合蛋白表达载体。当该载体在细胞中表达时，产生的融合蛋白会带有绿色荧光，可直接通过荧光显微镜观察其在细胞内的分布，亚细胞定位方法，进而确定目标蛋白的亚细胞定位。
为什么有的基因定位结果与预想的不一致？
对于一个特定的定位载体，亚细胞定位服务，只要荧光表达较好，其定位结果是确定的，不会随人为意愿或操作而改变。至于有时候和预想的结果不一样，可能和蛋白本身、选择的表达载体以及荧光蛋白融合方式等有关。
为什么有的普通定位结果出来后无法准确判断其定位位置？
细胞中的细胞器复杂且多样，除一些常见的、特征比较明显的细胞器外，有些细胞器在激光共聚焦下形状比较相似，例如：线粒体、过氧化物酶体、高尔基体等细胞器，它们的荧光表达形状可能都是点状，因此不易区分。这时可以结合基因的其他功能研究来判断其可能表达的位置。另外，蛋白表达本身也是一个复杂的过程，涉及到多个合成场所及转运过程，自身表达情况可能比较复杂，因此不易判断具体的表达位置。
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