






为什么不先对基因做预测,在预测的结果上直接做共定位?
不同的预测网站有不同的计算方法,亚细胞定位方法,同一个基因在不同的预测网站也可能得出不同的定位结果。另外所有的结果都应是基于实验得到的,亚细胞定位服务,对于不清楚可能定位在哪里的基因,一般推荐先做普通定位,根据普通定位的结果再决定做哪种细胞器的共定位。
适用于什么实验场景?
(1)基因功能研究,文章里总少不了这一项。
(2)研究蛋白相互作用,与酵母双杂实验结果相互验证。
亚细胞定位的重要性:
确定蛋白质功能:蛋白质的功能与其所处的亚细胞位置密切相关。例如,位于细胞核中的蛋白质可能参与基因调控,亚细胞定位公司,而在细胞质中的蛋白质可能参与代谢过程。通过确定蛋白质的亚细胞定位,可以为其功能研究提供重要线索。
揭示分子交互机理:不同亚细胞位置的蛋白质之间可能存在相互作用,这些相互作用对于细胞的正常生理功能至关重要。了解蛋白质的亚细胞定位有助于揭示这些分子交互机理。
为什么有的共定位图片中叶绿体通道是玫红色?
在拟南芥、、玉米、大麦、小麦等材料中,种植培养苗子时是正常接受光照的,叶片中含有大量叶绿体,而叶绿素在640nm左右的激发光下可产生红色的自发荧光。当在这些含叶绿体较多的受体材料中做共定位实验时,共定位marker一般为红色荧光(在560nm左右的激发光下),亚细胞定位,实验及共聚焦拍摄时两个波长通道的荧光互不影响,但视野下看着比较混淆,尤其叠加后二者不易分清,因此只是在颜色显示上将叶绿体自发荧光设置为玫红色,以显示和共定位marker的区别。

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