






为什么要提供GFP空载的对照图片?
(1)作为整个实验过程中的操作参照,可排除因实验操作而导致目的基因没有荧光信号的影响。
(2)作为载体体系的参照,确认构建载体时所使用的载体是可正常表达荧光蛋白的。
拍摄时为什么有明场通道?
(1)显示细胞状态,有活力的细胞应该有正确且明显的细胞形态,变形或破碎的细胞说明此时细胞不是适状态或细胞已。
(2)显示荧光确实是细胞内蛋白表达的,而不是细胞碎片及杂质产生的杂光。

植物生物学的研究已经取得了显著的进步,BIFC,但我们对植物启动子的了解仍然有限。尽管我们已经识别了一些重要的植物启动子,但我们仍然需要更深入的研究来理解它们如何识别和结合到DNA上,以及它们如何调控植物的生长发育和适应环境变化。未来的研究可能会集中在开发更有效的筛选方法和建立更的启动子数据库,以帮助我们更好地理解植物的基因表达调控机制。
植物启动子的筛选和研究是一项重要的研究任务,它不仅可以帮助我们更好地理解植物的生长发育和适应环境变化的能力,也可以为植物遗传育种和生物工程提供新的工具和策略。随着科技的不断进步和研究方法的不断完善,我们对植物启动子的理解将越来越深入,对植物生物学的理解也将越来越。
禾谷菌 CgRab5A 的亚细胞定位研究:刘涵等人利用多片段一步法将 CgRab5A 自身启动子、GFP 片段和 CgRab5A 开放阅读框(ORF)片段到 pKNT 载体上,转化型禾谷菌的原生质体后,通过共聚焦显微镜观察 GFP-CgRab5A 在菌丝和孢子内的定位情况。结果表明,GFP-CgRab5A 在菌丝和孢子细胞内均呈点状分布,定位于早期内涵体上。
水稻 OsUF 的亚细胞定位:丁作美等人通过得到水稻 E3 泛素连接酶 — 泛素融合蛋白(OsUF)基因的 cDNA 序列,并利用 Gateway 同源重组体系将 OsUF cDNA 全长重组到融合表达绿色荧光蛋白(GFP)的表达载体上,通过农杆菌介导的烟草瞬时表达系统进行亚细胞定位。结果显示,OsUF 蛋白定位在细胞核。
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