动物组织原位杂交-贝科新肽(在线咨询)

<p>将32 P标记的双链DNA探针于100℃加热5分钟，迅速置于冰浴中。单链探针不必变性。将探针加到杂交袋中杂交过夜。杂交期间，盛滤膜的容器应盖严，动物组织原位杂交，以防液体蒸发。</p><p>杂交结束后，去除杂交液，立即于室温把滤膜放入大体积（300-500ml）的2×SSC和0.1% SDS溶液中，轻轻振摇5分钟，并将滤膜至少翻转一次。重复洗 一次，同时应避免膜干涸。</p><p>68℃用300-500ml 1×SSC和0.1% SDS溶液洗膜两次，每次1-1.5小时。此时已可进行自显影。如背景很高或实验要求严格的洗膜条件，可用300-500ml 0.2×SSC和0.1% SDS的溶液于68℃将滤膜浸泡60分钟。<br /><br /><br /><br/><img src='https://img301.dns4.cn/pic1/352388/p2/20231011133012_9601_zs.jpg' /> </p><div id='div_zsDIV'></div> <br /><p>预杂交</p><p>1）每个管中置换成大约300ulHYB－溶液，60℃水浴5分钟，避免振荡。</p><p>2）用等体积的HYB＋取代HYB－。</p><p>3）60℃水浴，预杂交4小时以上。</p><p>杂交</p><p>1）吸去预杂交的HYB＋，加上100ul已加入探针的HYB＋溶液（探针浓度约为1ng/ul）..</p><p>2）60℃ 温浴过夜。</p><p>&nbsp;注：杂交与预杂交的温度可以是55到60度不等，温度越低，探针结合越好，温度越高，背景越小。<br /><br /><br /><br/><img src='https://img301.dns4.cn/pic1/352388/p2/20231011133012_9601_zs.jpg' /></p><br /><p>把滤膜放在纸巾上于室温晾干后，把滤膜（编号面朝上）放在一张保鲜膜上，并在保鲜膜上作几个不对称的标记，以使滤膜与性自显影片位置对应。</p><p>用第二张保鲜膜盖住滤膜。加光片并加上增感屏于-70℃曝光12-16小时。</p><p>底片显影后，在底片上贴一张透明硬纸片。在纸上标记阳性杂交信号的位置，同时在不对称分布点的位置上作出标记。可从底片上取下透明纸，通过对比纸上的点与琼脂上的点来鉴定阳性菌落。<br /><br /><br /><br/><img src='https://img301.dns4.cn/pic1/352388/p2/20231011133012_9601_zs.jpg' /> </p> <br /> 动物组织原位杂交-贝科新肽(在线咨询)由武汉贝科新肽科技有限公司提供。武汉贝科新肽科技有限公司实力不俗，信誉可靠，在湖北 武汉 的化学试剂等行业积累了大批忠诚的客户。贝科新肽带着精益求精的工作态度和不断的完善创新理念和您携手步入辉煌，共创美好未来！