1、通风柜在使用时，每2小时进行10分钟的补风（即开窗通风）；使用时间超过5小时的， 要敞开窗户，注意避免室内出现负压。
2、实验室内在不使用通风柜时也要时常通风，这样对试验人员的身体健康有益；
3、当2个以上的通风柜共同使用1个风机时，为避免操作失误或不当，风机的 “开”“关”只能由1个操作人员来控制；如另外一个通风柜暂时不使用或要停止使用，可使用风量调节阀来封闭通风口；避免相互重复“开”“关”风机，这样 不但对风机的寿命产生损害，对实验也不准确。
4、通风柜在使用时，避免人员走动带来的逆流风向对通风柜的干扰；
5、室内空气温度在-5℃至+40℃之间，24小时平均值不超过+25℃；
禁止通风柜内做国家禁止排放的有机物质与高氯化合物质混合的实验 ;禁止在没有安全的情况下将所实验的物质放置在通风柜内实验，一旦出现化学物质喷溅出来，应立即将电源切断 ;移动上下视窗时，要缓慢、轻移的操作，以免门拉手将手压坏 ;实验过程中，将视窗离台面100-150 mm为宜 ;通风柜的操作区域要保持畅通，通风柜周围避免堆放物品 ;操作人员在不使用通风柜时，通风柜台面避免存放过多试验器材或化学物质，禁止长期堆放。
另外通风柜上面都会安装一个玻璃视窗，便于我们观察实验的进程，但是这种玻璃并非我们常见的玻璃材质，pp材料通风柜，而是钢化玻璃，因此在使用过程中不会出现爆裂等问题，也不会对我们的人身安全带来影响，通风柜在安装玻璃视窗的同时，还会在上面同时设计一个防落插销，这样即使出现意外情况，玻璃视窗也不会落下，这个防落插销会保护实验人员的安全，防止碰伤实验人员。
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