原位杂交（In situ hybridazation）
固定
收集斑马鱼的胚胎，在Holfretor水中培养，到达所需要的发育时期时，原位杂交，用蛋白酶去除卵膜，用4%多聚甲醛固定，在4℃保存，二十四小时后用50%2%多聚甲醛溶液洗，然后换成，在-20C 保存，待用(两天和两天以上的胚胎需要用处理，去除色素。或者使用苯锍脲稀溶液培养，可阻断色素的形成)
原位杂交杂交液
（一）杂交液内除含一定浓度的标记探针外，还含有较高浓度的盐类、甲酰胺、硫酸葡聚糖、牛白蛋白及载体DNA或RNA等。
（二）杂交液中含有较高浓度的Na+可使杂交率增加，可以减低探针与组织标本之间的静电结合。
（三）贾酰胺可使杂交温度降低，所以杂交液中加入适量的甲酰胺，染色体荧光原位杂交，可避免因杂交温度过高而引起的组织形态结构的破坏以及标本的脱落。
（四）硫酸葡聚糖能与水结合，从而减少杂交液的有效容积，染色体原位杂交，提高探针有效浓度，植物原位杂交，以达到提高杂交率的目的。
原位杂交是一种非常重要的技术，因为它可以在细胞或组织的自然环境中研究基因表达和调控。它可以帮助科学家们了解基因在特定组织或细胞类型中的作用和功能，以及在疾病发生和发展过程中的变化。此外，这项技术还可以用于检测基因变异和染色体异常，以及监测细胞生长和凋亡。
虽然原位杂交是一项非常有用的技术，但它也有一些限制。首先，探针的特异性可能受到干扰，导致错误的结果。其次，探针的数量和位置可能受到细胞或组织中其他成分的影响。此外，这项技术的操作比较繁琐，需要专门的技术和设备，而且需要大量的实验和对照才能获得可靠的结果。
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