原位杂交技术原位杂交技术（In Situ Hybridization， ISH）是一种在生物样本（如组织切片、细胞涂片等）的原始位置上，通过核酸分子间的碱基互补配对原理，检测特定 DNA 或 RNA 序列的分子生物学技术。它能保留目标核酸在样本中的空间分布信息，是研究基因表达定位、染色体结构及病原体等的重要工具。一、技术原理原位杂交的原理是核酸分子的碱基互补配对：
探针设计：人工合成与目标核酸（DNA 或 RNA）序列互补的单链核酸片段（称为 “探针”），并对探针进行标记（如荧光、生物素等）。杂交反应：将标记的探针与经过处理的样本（含待检测核酸）孵育，探针通过碱基互补配对（A-T/U、G-C）与目标核酸特异性结合，动物组织原位杂交，形成杂交复合物。信号检测：通过检测探针上的标记物（如荧光信号、显色信号），定位目标核酸在样本中的位置和表达强度。
生物学研究基因表达定位：研究胚胎发育中关键基因的 mRNA 在组织或细胞中的表达部位（如神经管发育相关基因）；神经科学：分析神经元中特定基因的表达模式，揭示神经环路功能；进化生物学：比较不同物种同源基因的表达差异，探究进化关系。农业与畜牧业检测作物或畜禽的病原体（如植物病毒、动物核酸）；研究作物抗逆基因的表达定位，优化育种策略。
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