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层流手术室分为垂直层流式和水平层流式两种。垂直层流式（Supply air ceiling for operating theatre）过滤器装在手术病床的正上方，手术室净化工程，气流垂直吹送，回风口设在墙面的四角，确保手术台洁净度达标，一般多采用垂直层流式效果较好。正是采用的这种垂直的层流式，在手术室内的顶部还设置了一个吊塔式的负压吸引系统，将医生在手术时呼出的空气吸出塔外，进一步保证手术室的洁净和无菌，降低手术的率。
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层流手术室的空气压力根据其不同区域（如手术间、无菌准备间、刷手间、间和周围干净区域等）洁净度不同要求而不同。不同级别的层流手术室其空气洁净度标准不同，例如美国联邦标准1000级为每立方尺空气中≥0.5μm的尘粒数，≤1000颗或每升空气中≤35颗。10000级层流手术室的标准为每立方尺空气中≥0.5μm的尘粒数≤10000颗或每升空气中≤350颗。依次类推。
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（1）进入手术室必须更换洗手衣裤、鞋帽。（2）严格控制入室人数。（3）尽量减少层流手术室的开门次数与时间（更不可将门打开不关），维持"相对密闭状态"，以防外来污染的进入。（4）手术前用酒精擦拭室内物品、程仪器、设备等。（5）术后及时、清洁室内所有物品、墙壁及地面。（6）妇女不可用粉、头发喷雾剂和指甲油之类的化妆品，以减少污染来源。
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