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层流手术室不仅要求高度洁净的空气（进入手术室的空气首先须经过滤器净化），而且要求能控制气流的流通方向（即采用层流超净装置），使气流从洁净度高的手术区域流向洁净度低的区域，并带走和排出气流中的尘埃颗粒（尘粒）和细菌；层流是一股细小、薄层的气流，医院手术室净化工程，以均匀的流速向同一方向输送；净化气流的方向分为垂直层流式和水平层流式两种。垂直层流式（Supply air ceiling for operating theatre）过滤器装在手术病床的正上方，气流垂直吹送，回风口设在墙面的两侧下部（但不宜采用四角或四侧回风），确保手术台洁净度达标，一般多采用垂直层流式效果较好 层流手术室是一个"正压"环境，其空气压力根据其不同区域（如手术间、无菌准备间、刷手间、间和周围干净区域等）洁净度不同要求而不同。
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手术室一般工作制度1.凡进入手术室的工作人员，手术室净化，必须穿戴手术室的鞋帽、衣服及口罩，离开手术室时，应更换外出衣及鞋子。2.院外来参观、学习、实习者，须经医教科或护理部批准，千层净化手术室，并应有固定地点。3.各科择期手术，应在手术日上午10点半以前送手术通知单，百级净化手术室，急诊抢救手术，可先口头通知，后补手术通知单。4.手术按手术通知单时间进行，必须准时到位，不得随意更改。特殊情况与护士联系。5.术前30分钟接，随带病历，并详细核对姓名、性别、年龄、床号、诊断、手术部位及药敏试验、术前用药。病员入室后，巡回护士应复查一遍，注意手术部位清洁范围，首饰、假牙、手表不得带入手术室。
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按手术有菌或无菌的程度，手术间可划分成以下5类：(1)Ⅰ类手术间：即无菌净化手术间，主要接受颅脑、心脏、脏器移植等手术。(2)Ⅱ类手术间：即无菌手术间，主要接受脾切除手术、闭合性切开复位术、眼内手术、甲状腺切除术等无菌手术。(3)Ⅲ类手术间：既有菌手术间，接受胃、胆囊、肝、阑尾、、肺等部位的手术。
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