









BIOREADER 4000 F α(ELISPOT)的原理是什么呢

(一)原理:细胞受到刺激后局部产生细胞因子,被PVDF膜上特异性单clone Antibody捕获。细胞分解后,再与生物素标记的二抗结合,其后再与碱性磷酸酶标记的亲和素结合。BCIP/NBT底物孵育后,PVDF膜出现“紫色”的斑点为阳性反应。
(二)ELISPOT与ELISA的区别
1.ELISA通过显色反应,在Microplate reader上测定吸光度,与标准曲线比较得出可溶性蛋白总量。
2.ELISPOT通过显色反应,在细胞分泌这种可溶性蛋白的相应位置上显现清晰可辨的斑点,可直接在显微镜下或通过仪器对斑点进行计数,1个斑点代表1个细胞,BIOREADER 4000 F α生产厂家,从而计算出分泌该蛋白的细胞的频率。
3.由于是单细胞水平检测,ELISPOT比ELISA和有限稀释法等更灵敏,能从20万~30万个细胞中检出1个分泌该蛋白的细胞。
4.捕获Antibody为高亲和力、高特异性和低内toxin McAb,在研究者以刺激剂activation细胞时,不会影响活化细胞分泌细胞因子。
T细胞的ELISpot分析应用:
ELISpot是研究特异性免疫反应的敏感方法,能够区分活化的T细胞亚群。例如,Th1细胞产生干扰素-γ、IL-2和TNF-α,而Th2细胞产生其他细胞因子,BIOREADER 4000 F α,如IL-4、IL-5和IL-13。例如,BIOREADER 4000 F α多少钱,这被广泛应用于infectious disease、cancer、过敏和自身免疫性疾病的研究。
在vaccine研究中,ELISpot是一种标准工具,用于通过测量激发强大T细胞反应的能力(通常是干扰素-γ的分泌)来确定vaccine的有效性。基于ELISpot的诊断分析已经可用,BIOREADER 4000 F α哪家好,包括一种通过测量T细胞对tuberculosis分枝Bacillus特定抗原的反应分泌干扰素-γ来检测tuberculosis病感染患者的测试。

BIOREADER 4000 F α解决的问题
ELISPOT 分析仪的出现解决了以下问题:
哪些斑点是抗原特异性 T 细胞产生的(此斑点具有进一步分析价值),哪些是无关细胞产生的(此斑点没有 T 细胞研究价值)
斑点大小的意义
在对不同细胞因子计数和分析时,如何定义斑点MIN和MAX尺寸
如何从单个细胞基础上分析
实验accurate度有多高?如果一个细胞产生相似的细胞因子,在多大程度上会干扰分析结果?
几次重复实验才能使结果更有意义?

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