









免疫斑点检测仪实验步骤与原理示意 (示意图如下)
大致原理上分为如下7个步骤,详情已具体产品说明书为准

Step.1 包被:将单clone捕获Antibody添加到乙醇处理的PVDF膜板上
Step.2 细胞孵育:在有刺激的情况下加入细胞,孵育,细胞分泌细胞因子
Step.3 捕获分泌物:activation后的细胞,分泌的细胞因子被周围的Antibody结合捕获
Step.4 检测Antibody:去除细胞,清洗平板,加入生物素化的检测Antibody
Step.5 链霉亲和素-酶偶联物:加入链霉亲和素偶联物,保证后续在膜上形成斑点
Step.6 加反应底物:当酶催化时,免疫斑点检测仪,显色底物形成不溶性沉淀
Step.7 结果分析:在自动点阅读器中对结果进行分析。每个斑点对应一个分析物分泌细胞
酶联免疫斑点技术(Enzyme Linked Immunospot Assay,简称ELISPOT)
是细胞免疫学研究中更敏感的检测方法,可以在单细胞水平对Antibody分泌细胞(ASC)及细胞因子(CK)分泌细胞进行检测,比ELISA和有限稀释法等具有更髙的灵敏性,免疫斑点检测仪报价,能从20万-30万细胞中检岀1个分泌该蛋白的细胞。并且该方法能够对抗原刺激后的Living cells进行功能性检测,具有较髙的特异性、直观可信度髙,并且易操作,已被广泛用于分泌CK细胞检测或ASC测定中,免疫斑点检测仪厂家,在国内外免疫学界获得了广泛的应用。
ELISPOT实验步骤

淋巴细胞受到抗原刺激后局部产生细胞因子,此细胞因子被ELISPOT板底PVDF膜上(预包被的)的特异性单抗捕获。去除细胞后,BEI捕获的细胞因子与生物素标记的单抗结合,其后再与碱性磷酸酶或辣根过氧化物酶标记的亲和素结合。加底物显色后,PVDF膜上出现紫色或红褐色的斑点表明细胞产生了细胞因子,免疫斑点检测仪生产厂家,通过酶联免疫斑点分析仪(ELISPOT Reader)对斑点的进行自动计数和分析。
德国bioreader酶联斑点分析仪
●立体3D双光照明系统可实现更好的细胞因YI定量和簇分离,
●简洁强悍的界面友好型操作:类似Windows Office 软件界面,类似邮件文件夹操作;
●自动斑点大小识别技术(Auto-Size):辅助真实斑点自动计数;
●自动边缘识别技术(Auto-Border):尤其针对透明板、白色PVDF板,可有效识别板孔边缘,确保识别全孔斑点;
局部斑点3D 放大技术;
斑点光密度值分析和3D 细胞因YI分泌峰技术,可形成斑点细胞因YI分泌量相对定量输出;
●亚像素(Sub-Pixel)技术:增强斑点图像识别清晰度;
融合斑点自动分离识别技术和纤维去除技术;
图像自动居中、自动暴光、自动白平衡、自动光照调节等
●三种人工质控方式:可指ding单独斑点,指ding区域,或指ding标准斑点人工干预计数标准;
具备双色ELISPOT 斑点分析功能;
无需染色即可计数细胞克long;
扫描和分析,可分离进行,也可以整合进行;

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