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层流手术室的空气压力根据其不同区域（如手术间、无菌准备间、刷手间、间和周围干净区域等）洁净度不同要求而不同。不同级别的层流手术室其空气洁净度标准不同，例如美国联邦标准1000级为每立方尺空气中≥0.5μm的尘粒数，≤1000颗或每升空气中≤35颗。10000级层流手术室的标准为每立方尺空气中≥0.5μm的尘粒数≤10000颗或每升空气中≤350颗。依次类推。
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层流手术室分为垂直层流式和水平层流式两种。垂直层流式（Supply air ceiling for operating theatre）过滤器装在手术病床的正上方，气流垂直吹送，回风口设在墙面的四角，确保手术台洁净度达标，一般多采用垂直层流式效果较好。正是采用的这种垂直的层流式，在手术室内的顶部还设置了一个吊塔式的负压吸引系统，将医生在手术时呼出的空气吸出塔外，进一步保证手术室的洁净和无菌，降低手术的率。
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在新风管道上采用双位控制的定风量装置，当手术室工作时，空调系统开启，排风机开启，新风管上的双控阀实施调节，手术室净化，满足室内正压要求;当手术室不工作时，空调机组关闭，排风机关闭，手术室净化装修，新风管上的双控阀开启，让新风进入室内维持正压和有序的压力梯度。采取上述方式形成有效的保障体系，既保证了手术室在正常工作期间整个手术部正常压力分布和空气的定向流动，同时也保证了手术室在非工作期间房间内的正压，保持手术室的洁净状态。
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