LC-MS/MS是液相色谱(LC)与串联质谱(MS/MS)的结合，用于分离、鉴定和定量复杂混合物中的微量化合物。
工作流程三步走：
1.液相色谱(LC)-分子“马拉松”：样品溶液注入色谱柱。不同组分因与柱内填料的相互作用强弱不同，在流动相驱动下“赛跑”，依次流出，实现物理分离。
2.一级质谱(MS1)-离子化与初选：从LC流出的组分进入质谱离子源（如电喷雾ESI），被转化为带电离子（分子离子或碎片离子）。MS1按质荷比(m/z)筛选出目标离子（称为母离子/前体离子）。
3.二级质谱(MS/MS)-深度“解剖”与确认：选中的母离子进入碰撞池，与惰性气体碰撞碎裂，产生特征性的子离子/碎片离子。这些子离子进入第二个质量分析器再次按m/z分离检测。通过分析母离子-子离子的特定对应关系（称为离子对/反应监测MRM），实现对目标化合物的高特异性、高灵敏度识别与定量。
为何需要串联(MS/MS)?
*排除干扰：即使LC未能完全分离，MS/MS也能通过的离子对关系，在复杂背景中找到目标信号。
*提高特异性：子离子谱如同分子的“指纹”，提供更确凿的结构鉴定证据。
*结构信息：碎片模式有助于推断化合物结构。
优势与应用：
*超高灵敏度：可检测极低浓度（如ng/mL，pg/mL级别）。
*选择性：有效区分结构相似物和基质干扰。
*广泛应用：代谢研究（PK/PD）、生物标志物发现、临床诊断（、维生素、浓度监测）、食品安全（农残、兽残）、环境污染物分析、法医毒物分析等。
总结：LC-MS/MS如同精密“分子”，LC负责分离目标，MS1锁定目标，MS/MS则深入“审问”获取关键特征信息，终实现复杂基质中目标化合物的定性与定量，是现代痕量分析不可或缺的利器。
lc ms/ms 流动相选择：不同样品类型适配方案。
在LC-MS/MS分析中，流动相的选择至关重要，直接影响色谱分离效果、目标物离子化效率以及质谱检测灵敏度与特异性。选择需兼顾色谱分离（柱效、保留、峰形）和质谱兼容性（挥发性、低背景、促进离子化）。针对不同样品类型，适配方案如下：
1.生物样品（血浆、、尿液、组织匀浆液）：
*挑战：基质复杂（蛋白质、磷脂、盐分、内源性代谢物），易产生基质效应（离子抑制/增强）和色谱柱污染。
*适配方案：
*溶剂体系：水-体系。相比能提供更强的洗脱力、更低的粘度（利于高流速）和更低的背景噪音，且能更有效地沉淀蛋白（尤其在水相比例高时）。在需要更强保留或更低成本时可部分替代。
*缓冲盐/添加剂：
*：甲酸(0.1%)。广泛用于正离子模式（ESI+），促进质子化，挥发性，背景低。甲酸铵(2-10mM)是选择，提供缓冲能力（pH~3.5），稳定保留时间，铵离子有助于[M+H]+或[M+NH4]+加合物的形成，减少钠/钾加合物干扰，挥发性好。
*次选/特定情况：(0.1-0.5%)或铵(5-20mM)。适用于某些对甲酸响应不佳或在负离子模式（ESI-）下分析酸性化合物（如某些、有机酸）。体系pH略高（~4.8），可能改变某些化合物的保留和选择性。
*关键点：强调梯度洗脱，起始高水相（≥90%）有助于将强极性基质干扰物冲出，减少柱污染和基质效应。样品前处理（如蛋白沉淀、LLE、SPE）是降低基质干扰的基础。
2.环境样品（水、土壤、沉积物提取物）：
*挑战：目标物浓度通常极低（痕量/超痕量），LCMS-MS服务多少钱一次，基质复杂（腐殖酸、无机盐、其他污染物），干扰多。
*适配方案：
*溶剂体系：水-或水-均可。对某些极性稍强的污染物（如、Ps）保留稍强，成本更低。背景噪音通常更低。
*缓冲盐/添加剂：
*：甲酸铵(2-10mM)或铵(5-20mM)。提供必要的缓冲能力和挥发性。铵盐能有效减少加合物形成，提高灵敏度重现性。具体选择取决于目标物性质（酸碱性、极性）和色谱柱。
*特定情况：分析强极性化合物（如草甘、全氟化合物）时，可能需要使用氨水(0.1-0.2%)或铵缓冲液(pH~9)结合亲水相互作用色谱（HILIC）或特殊保留机制柱，在负离子模式下检测。
*关键点：梯度洗脱，以分离宽极性范围的污染物。样品前处理（如SPE）是富集目标物和去除基质的关键步骤。流动相纯度要求极高（LC-MS级）。
3.食品/植物提取物：
*挑战：基质极其复杂（糖类、色素、脂类、酚类、等），干扰物多，目标物种类多样（残留、、营养素、添加剂）。
*适配方案：
*溶剂体系：水-或水-。在去除色素和脂溶性干扰方面有时更优，且背景更低。成本更低。
*缓冲盐/添加剂：
*：甲酸铵(5-10mM)或铵(5-20mM)。这是和稳健的选择，提供良好的缓冲、挥发性，适用于大多数目标物（、霉菌、维生素等）。甲酸(0.1%)也常用，尤其在正离子模式主导的分析中。
*特定情况：分析强酸性（如某些有机酸、酚酸）或强碱性化合物时，可能需要调整pH（如用氨水调至碱性）。
*关键点：梯度洗脱范围通常较宽。样品前处理（QuEChERS，SPE，液液萃取）对去除干扰至关重要。可能需要使用保护柱。
4.分子/合成中间体：
*挑战：目标物通常明确，但理化性质差异大（极性、酸碱性、分子量），需要高选择性分离。
*适配方案：
*溶剂体系：水-或水-。根据目标物保留和溶解性选择。洗脱力强，粘度低。
*缓冲盐/添加剂：
*：甲酸(0.05-0.1%)广泛用于碱性（ESI+）。甲酸铵(2-10mM)提供更稳定的保留时间，减少加合物。/铵常用于酸性（ESI-）或需要不同选择性的情况。
*特定情况：分析强碱性化合物（易形成多电荷或硅醇基相互作用强）时，可考虑加入三乙胺(0.1-0.2%)或二乙胺(DEA，0.1%)抑制硅醇基活性，改善峰形（但需评估质谱响应和残留）。分析强酸性化合物用氨水或三乙胺缓冲液（ESI-）。
*关键点：方法开发需系统优化有机相比例、缓冲盐浓度和pH，以获得分离和离子化。
通用原则总结
*挥发性优先：避免磷酸盐、硫酸盐等高沸点缓冲盐，必须使用挥发性缓冲盐（甲酸、、氨水）及其铵盐。
*pH控制：pH是控制化合物离子化状态（影响保留和离子化效率）和色谱峰形的关键。ESI+常用pH2-4(甲酸/)，ESI-常用pH8-10(氨水)。
*缓冲能力：铵盐（甲酸铵、铵）提供比纯酸/碱更好的缓冲能力，稳定保留时间。
*选择：（低粘度、强洗脱力、低背景）通常是，（成本低、不同选择性）是重要替代。
*梯度洗脱：对于复杂样品或宽极性范围目标物，梯度洗脱是标准配置。
*样品前处理：流动相选择必须与有效的样品前处理相结合，以降低基质干扰。
*系统优化：组合需通过实验（如中心复合设计）优化有机相比例、缓冲盐浓度和pH。
遵循这些适配原则，结合具体样品特性和目标分析物性质，衢州LCMS-MS服务，可以显著提高LC-MS/MS方法的灵敏度、选择性和稳健性。
LCMS-MS服务避坑指南：别被“”忽悠了！
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2.设备状态堪忧：LCMS-MS仪器精密昂贵，维护成本高。超可能意味着设备老旧、未按时校准维护，或使用劣质耗材（色谱柱、溶剂），导致灵敏度低、稳定性差、结果重现性不佳。
3.人员经验不足：分析人员是数据可靠性的。可能对应着新手操作、经验匮乏，在复杂样品前处理、方法开发、故障排除及数据解读上能力不足。
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避坑策略：
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