亚细胞定位原理
利用GFP、RFP等荧光蛋白具有的荧光性质和灵敏性，双分子荧光互补技术，来示踪细胞内的蛋白。将目标蛋白与荧光蛋白的N端或者C端融合，通过瞬转或稳转，使该融合蛋白在受体材料细胞内表达，目标蛋白会牵引荧光蛋白一起定位到目标细胞器，经过激光共聚焦显微镜激光照射，荧光蛋白会发出荧光，通过观察荧光蛋白在细胞内显示的位置，从而可以确定目标蛋白的亚细胞定位情况，即可对蛋白质进行准确定位。
相关数据库
SUBA：主要聚焦于植物蛋白质的亚细胞定位信息，为研究植物细胞内蛋白质的分布和功能提供了丰富的数据资源。
Cell-PLoc：提供了多种生物蛋白质亚细胞定位的预测和注释信息，涵盖了细菌、真菌、动物和植物等多个物种。
Human Protein Atlas：专注于人类蛋白质的亚细胞定位数据，通过多种实验技术和方法，系统地对人类蛋白质在细胞内的位置进行了标注和展示。
用水稻原生质体进行亚细胞定位时，为什么不拍摄叶绿体的自发荧光？
经测验，使用水稻黄化苗制备原生质体，载体转化效率及基因表达强度较高，而黄化苗中叶绿体较少，因此水稻原生质体定位拍照时，除非与叶绿体共定位，否则不拍摄叶绿体的自发荧光。
为什么要提供GFP空载的对照图片？
（1）作为整个实验过程中的操作参照，可排除因实验操作而导致目的基因没有荧光信号的影响。
（2）作为载体体系的参照，确认构建载体时所使用的载体是可正常表达荧光蛋白的。
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