应用场景
外泌体的形态学鉴定（区分外泌体与微囊泡、凋亡小体）；
疾病标志物研究（如来源外泌体的形态变化）；
外泌体载药 / 工程化后的结构表征；
外泌体与细胞 / 材料相互作用的超微观察。
一、一句话区别
TEM（透射电镜）：看内部、看膜结构、看典型外泌体形貌 → 外泌体鉴定金标准
SEM（扫描电镜：看表面、看立体形貌、看分布 → 辅助观察，外泌体检测服务，不做主鉴定
二、关键区别（外泌体版）
1. 看什么不一样
TEM（透射）
电子穿透样品
看到：膜结构、双层膜、杯状 / 茶托状、大小均一性
能直接判断：这是不是外泌体
典型图：一个个圆盘 / 杯状小囊泡
SEM（扫描）
电子只扫表面
看到：3D 立体表面、颗粒圆润度、分布密度
看不到内部膜结构
典型图：一堆小圆球堆在一起
外泌体电镜是纳米级外泌体（直径通常 30–150 nm）形态鉴定与结构分析的技术，主流为透射电镜（TEM，含负染、超薄切片）、冷冻透射电镜（Cryo-TEM），辅以扫描电镜（SEM）和电子断层扫描（ET），是外泌体 “金标准” 鉴定方法之一（常与 NTA、Western blot 联用）。
常用技术与流程
负染 TEM（常规）
原理：用 2% 磷钨酸（PTA，pH 6.5–7.0）或醋酸双氧铀染背景，样品本身不被强染，形成亮边暗中心的反差，清晰显示双层膜与杯状 / 茶托形态。
流程：碳支持膜铜网滴样（5–10 μL，静置 10 min 吸附）→ 滤纸侧吸余液 → 负染 1–2 min → 吸干晾干 → 80–120 kV、50k–100k 倍观察。
优点：快速、成本低、样品需求量小；缺点：化学染色可能轻微改变结构，盐结晶易干扰。
植物外泌体（植物源外泌体样纳米颗粒，PELNs）检测以形态、粒径、浓度、生化组成、纯度为，优先用TEM+NTA+WB / 质谱组合鉴定，再做功能与质控检测。
一、鉴定三要素（ISEV 标准）
1. 形态学观察（TEM/SEM/AFM）
透射电镜（TEM）：金标准，可见双层膜、杯状 / 茶托状、近球形结构，粒径 30–150 nm。
扫描电镜（SEM）：看表面形貌与分散性。
原子力显微镜（AFM）：测三维形貌与膜厚度。
2. 粒径与浓度（NTA/DLS）
纳米颗粒跟踪分析（NTA）：单颗粒，给出粒径分布（30–150 nm 为主）、浓度、多分散性，适合复杂样本。
动态光散射（DLS）：测平均粒径与 PDI，适合单分散体系，不能替代 NTA。
合格参考：主峰 30–150 nm，浓度≥1×10? particles/mL。
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