动植物外泌体-贝科新肽(推荐商家)

电子断层扫描是一种能够实现样品三维结构重构的电镜技术，其原理是利用电子束对样品进行多角度（通常为±60°）倾斜拍摄，获取系列二维图像，然后通过计算机软件对这些二维图像进行对齐、重构，生成样品的三维结构模型，动植物外泌体，从而呈现样品的空间形态和内部成分分布。在了你外泌体研究中，ET技术通常与TEM或Cryo-TEM结合使用，分别称为TEM-ET和Cryo-ET，其中Cryo-ET由于能够保留外泌体的天然形态，应用更为广泛，是研究外泌体三维结构的技术之一。

免疫 TEM

结合胶体金标记的特异性（如 CD63、CD9），可在电镜下直接定位外泌体表面标志物，实现形态与分子特征的同步验证。

SEM

聚焦样品表面形貌，需喷金导电处理；分辨率略低于 TEM，多用于观察外泌体在材料 / 细胞表面的附着形态，而非内部精细结构。

关键质控与判读要点

典型外泌体：30–150 nm，双层膜，常呈杯状；无膜的球形颗粒多为脂蛋白 / 蛋白聚集体；盐结晶呈规则几何状，需区分。

样品浓度需合适（推荐≥10? particles/mL），过浓重叠、过稀难寻；PTA 的 pH 必须接近中性，避免膜损伤。

观察用低剂量模式，减少电子束对样品的辐照损伤。

冷冻 TEM（近天然结构）

原理：样品快速浸入液态玻璃化，全程无化学固定 / 脱水 / 染色，在液氮低温下成像，可观察真实双层膜、内容物，适合高分辨率结构研究。

流程：3 μL 样品滴多孔碳网 → 滤纸轻吸成薄水膜 → 液态冷冻 → 液氮转移至电镜冷台（-170℃以下）成像；冷冻断层扫描（cryo-ET）可重构 3D 结构。

优点：结构保真度极高；缺点：设备昂贵、操作复杂。

超薄切片 TEM

用于细胞内 / 组织中外泌体定位，或观察群体分布；流程： + 双固定 → 梯度脱水 → 环氧树脂包埋 → 切片机切成 40–90 nm 薄片 → 醋酸铀 + 柠檬酸铅染色 → TEM 观察。

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