







其他生理功能。外泌体还参与机体的代谢调节、神经信号传递、生殖发育等生理过程。例如,神经细胞分泌的外泌体能够携带神经递质和信号分子,参与神经突触的形成和功能调节;生殖细胞分泌的外泌体则能够调控生殖细胞的成熟和受精过程,影响生殖发育。
免疫电镜(Immuno-TEM)结合胶体金标记的特异性,定位外泌体表面 / 内部蛋白(如 CD63、CD81、TSG101),用于外泌体亚群鉴定与功能验证。
关键问题与质控
背景过深 / 颗粒聚集:多为染色时间过长、样品浓度过高或盐未洗净;优化染色时长、稀释样品、增加超纯水漂洗步骤。
无典型膜结构:可能是蛋白聚集体或脂蛋白;结合 NTA 粒径分析、Western blot(检测外泌体标志蛋白)联合鉴定。
重复性:需拍摄 10 个以上不同视野,统计粒径分布与形态比例。

外泌体电镜的标准操作流程:
样品制备(超离后/色谱后样本的稀释、上样技巧)。
负染步骤详解(醋酸双氧铀 vs. 磷钨酸的选择、浓度、时间、注意事项)。
制样常见陷阱(如何避免“盐结晶”、样品聚集、染色沉淀)。
关键图谱解读与陷阱分析:
外泌体的典型形态(“杯状结构”的成因与争议)。
如何区分外泌体、微囊泡、脂蛋白、蛋白聚合物。
常见假象(箭头指向关键特征,解释其成因)。
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