






电子断层扫描是一种能够实现样品三维结构重构的电镜技术,其原理是利用电子束对样品进行多角度(通常为±60°)倾斜拍摄,获取系列二维图像,然后通过计算机软件对这些二维图像进行对齐、重构,生成样品的三维结构模型,从而呈现样品的空间形态和内部成分分布。在了你外泌体研究中,ET技术通常与TEM或Cryo-TEM结合使用,分别称为TEM-ET和Cryo-ET,其中Cryo-ET由于能够保留外泌体的天然形态,应用更为广泛,是研究外泌体三维结构的技术之一。

标准检测流程(推荐)
样本前处理:收集质外体液 / 汁液,过滤(0.45/0.22 μm),去多糖 / 多酚 / 果胶。
分离纯化:差速离心→密度梯度离心 / 尺寸排阻 / 超滤→浓缩。
鉴定:
TEM:形态 + 粒径
NTA:粒径分布 + 浓度
WB / 质谱:标志蛋白
核酸 / 脂质分析
纯度验证:粒子 / 蛋白比、破膜实验、污染标志物检测。
功能验证:细胞摄取、活性、 / 抗病等。
五、质控与合规(如 FDA DMF)
纯度、粒径 / 浓度、形态、蛋白 / 核酸 / 脂质组成、稳定性、生物活性、安全性(细胞毒性)、抗原性。
植物外泌体检测难点
植物样本含大量多糖、多酚、果胶、细胞壁碎片,易共沉淀,干扰检测。
缺乏广谱、高特异性植物外泌体,标志物鉴定受限。
提取量极低(1 kg 样本≈μg 级),需高灵敏度方法。
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