植物外泌体检测-贝科新肽(推荐商家)

与扫描电镜不同，TEM需要将样品制备成超薄切片（厚度通常为50~100 nm）或直接将纳米级样品吸附在载样网上，植物外泌体检测，确保电子束能够穿透样品。对于外泌体样品，通常采用负染法或正染法进行染色处理，以增强样品与背景的对比度，便于观察外泌体的形态和结构——负染法是利用高电子密度的重金属盐（如磷钨酸、醋酸铀）包裹外泌体表面，使背景呈现深色，外泌体呈现亮白色的“亮核暗晕”形态；正染法则是让重金属盐渗透到外泌体内部，使外泌体呈现深色的“暗核亮背景”形态，两种染色方法各有优势，可根据研究需求选择使用。

冷冻透射电镜（cryo-TEM）无需化学固定与染色，将样品快速浸入液态玻璃化冷冻，在液氮温度下成像；能保留外泌体天然结构（膜、内部成分），适合高分辨率三维重构（冷冻电子断层扫描 cryo-ET）；缺点是设备昂贵、样品制备门槛高。

超薄切片 TEM外泌体经 / 双固定、脱水、树脂包埋后，切成 40–90 nm 超薄切片，染色后观察；适合观察细胞内多囊体释放外泌体的原位结构，或外泌体群体的内部细节。

扫描电镜（SEM）电子束扫描样品表面成像，主要看外泌体在基底上的分布与表面形貌；需喷金导电处理，分辨率略低于 TEM，不适合观察内部膜结构。

生化标志物（蛋白 / 核酸 / 脂质）

蛋白标志物：

植物特有：TET8、PEN1、SYP121、HSP70等膜转运 / 热激蛋白。

通用：CD63/CD9/TSG101交叉反应弱，不推荐；优先 WB + 质谱。

核酸：小 RNA 测序、qPCR 检测 miRNA/sRNA；外泌体富集特定 RNA。

脂质：磷脂、鞘脂、胆固醇；质谱分析脂质组。

二、纯度与完整性检测

BCA+NTA：计算粒子 / 蛋白比（particles/mg），比值越高纯度越好。

Triton X?100 破膜实验：验证膜结构完整性；破膜后 NTA 颗粒数显著下降。

排除污染：检测叶绿体 / 线粒体标志物、多糖、多酚、果胶（植物样本易污染）。

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