植物外泌体（植物源外泌体样纳米颗粒，PELNs）检测以形态、粒径、浓度、生化组成、纯度为，优先用TEM+NTA+WB / 质谱组合鉴定，再做功能与质控检测。
一、鉴定三要素（ISEV 标准）
1. 形态学观察（TEM/SEM/AFM）
透射电镜（TEM）：金标准，可见双层膜、杯状 / 茶托状、近球形结构，粒径 30–150 nm。
扫描电镜（SEM）：看表面形貌与分散性。
原子力显微镜（AFM）：测三维形貌与膜厚度。
2. 粒径与浓度（NTA/DLS）
纳米颗粒跟踪分析（NTA）：单颗粒，给出粒径分布（30–150 nm 为主）、浓度、多分散性，外泌体NTA检测，适合复杂样本。
动态光散射（DLS）：测平均粒径与 PDI，适合单分散体系，不能替代 NTA。
合格参考：主峰 30–150 nm，浓度≥1×10? particles/mL。
新兴的分离技术中，微流控芯片技术凭借快速、、低样本消耗的优势，成为临床转化的重点方向，其基于微通道设计，可通过尺寸筛选、免疫捕获等原理，实现外泌体的快速分离与纯化，部分基于纳米材料的微流控技术可实现高纯度分离，大幅提升检测效率。此外，EXODUS系统等新型纯化系统，与传统离心法相比，在分离效率与样本活性保留上具有一定优势，已被用于牛奶、尿液等体液中外泌体的分离研究。
免疫电镜（Immuno-TEM）结合胶体金标记的特异性，定位外泌体表面 / 内部蛋白（如 CD63、CD81、TSG101），用于外泌体亚群鉴定与功能验证。
关键问题与质控
背景过深 / 颗粒聚集：多为染色时间过长、样品浓度过高或盐未洗净；优化染色时长、稀释样品、增加超纯水漂洗步骤。
无典型膜结构：可能是蛋白聚集体或脂蛋白；结合 NTA 粒径分析、Western blot（检测外泌体标志蛋白）联合鉴定。
重复性：需拍摄 10 个以上不同视野，统计粒径分布与形态比例。
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