外泌体分离纯化是检测的前提，目标是从复杂体液中分离出高纯度、高活性的外泌体，去除蛋白质、脂质复合物等杂质干扰。目前常用的分离纯化技术主要包括以下几种：离心法是外泌体分离的“金标准”，通过不同转速的离心步骤，逐步去除细胞碎片、大囊泡等杂质，终获得外泌体，该方法纯度较高，但操作繁琐、耗时较长，且可能导致外泌体结构破坏，不利于后续活性分析与内容物提取。密度梯度离心法在离心的基础上加入密度介质，通过密度差异实现外泌体的分离，纯度优于普通离心法，但同样存在操作复杂、通量低的问题。
植物外泌体（植物源外泌体样纳米颗粒，PELNs）检测以形态、粒径、浓度、生化组成、纯度为，优先用TEM+NTA+WB / 质谱组合鉴定，再做功能与质控检测。
一、鉴定三要素（ISEV 标准）
1. 形态学观察（TEM/SEM/AFM）
透射电镜（TEM）：金标准，可见双层膜、杯状 / 茶托状、近球形结构，粒径 30–150 nm。
扫描电镜（SEM）：看表面形貌与分散性。
原子力显微镜（AFM）：测三维形貌与膜厚度。
2. 粒径与浓度（NTA/DLS）
纳米颗粒跟踪分析（NTA）：单颗粒，给出粒径分布（30–150 nm 为主）、浓度、多分散性，适合复杂样本。
动态光散射（DLS）：测平均粒径与 PDI，适合单分散体系，不能替代 NTA。
合格参考：主峰 30–150 nm，浓度≥1×10? particles/mL。
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