冷冻 TEM（近天然结构）
原理：样品快速浸入液态玻璃化，全程无化学固定 / 脱水 / 染色，在液氮低温下成像，可观察真实双层膜、内容物，适合高分辨率结构研究。
流程：3 μL 样品滴多孔碳网 → 滤纸轻吸成薄水膜 → 液态冷冻 → 液氮转移至电镜冷台（-170℃以下）成像；冷冻断层扫描（cryo-ET）可重构 3D 结构。
优点：结构保真度极高；缺点：设备昂贵、操作复杂。
超薄切片 TEM
用于细胞内 / 组织中外泌体定位，或观察群体分布；流程： + 双固定 → 梯度脱水 → 环氧树脂包埋 → 切片机切成 40–90 nm 薄片 → 醋酸铀 + 柠檬酸铅染色 → TEM 观察。
应用场景
外泌体的形态学鉴定（区分外泌体与微囊泡、凋亡小体）；
疾病标志物研究（如来源外泌体的形态变化）；
外泌体载药 / 工程化后的结构表征；
外泌体与细胞 / 材料相互作用的超微观察。
一、一句话区别
TEM（透射电镜）：看内部、看膜结构、看典型外泌体形貌 → 外泌体鉴定金标准
SEM（扫描电镜：看表面、看立体形貌、看分布 → 辅助观察，不做主鉴定
二、关键区别（外泌体版）
1. 看什么不一样
TEM（透射）
电子穿透样品
看到：膜结构、双层膜、杯状 / 茶托状、大小均一性
能直接判断：这是不是外泌体
典型图：一个个圆盘 / 杯状小囊泡
SEM（扫描）
电子只扫表面
看到：3D 立体表面、颗粒圆润度、分布密度
看不到内部膜结构
典型图：一堆小圆球堆在一起
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