






农杆菌侵染与共培养将活化的农杆菌菌液调配至适宜OD值,将筛选后的胚性愈伤浸入菌液浸泡侵染,适度震荡保证菌液充分附着;捞出愈伤吸干表面多余菌液,接种于共培养基,棉花基因转化,25℃避光暗培养2–3天,完成T-DNA的转移与基因组整合。4. 抗性筛选与愈伤继代共培养结束后,用无菌水洗脱愈伤表面残留农杆菌,吸干水分后转入含对应筛选剂的筛选培养基,28℃避光培养。经过2–3轮继代筛选,淘汰未转化的阴性愈伤,获得增殖状态良好的抗性阳性愈伤组织。

水稻基因转化原理
水稻基因转化的流程与禾本科作物通用逻辑一致,即外源基因递送—基因组整合—愈伤再生—植株驯化—稳定遗传。通过生物介导、物理或化学转化手段,将携带目的基因、启动子、终止子、筛选标记的外源DNA导入水稻受体细胞,依靠细胞自身重组机制完成外源基因的基因组整合;再通过水稻专属组织培养体系,将转化后的愈伤组织、胚性为完整植株,经过多代筛选与分子鉴定,获得性状稳定、可稳定遗传的水稻株系。
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