载体构建与菌株活化根据实验需求构建植物表达载体，将目的基因、特异性启动子、终止子、抗性筛选标记（潮抗性、草铵抗性为水稻常用筛选标记）插入二元载体T-DNA区域，测序验证序列无误后，将重组载体导入EHA105等农杆菌感受态细胞，筛选阳性单菌落，大豆基因转化，活化备用。2. 水稻愈伤组织诱导选取饱满无破损的水稻成熟种子，去除外壳，经过酒精、次梯度无菌消毒后，接种于愈伤诱导培养基。26–28℃避光暗培养2–3周，诱导种子盾片产生淡黄色、颗粒状、致密的胚性愈伤组织，剔除褐化、水渍化的无效愈伤，挑选胚性愈伤作为转化受体。
水稻作为模式单子叶作物，相较于玉米，组织培养再生体系更成熟、基因型依赖性更弱，多数常规水稻品种均可实现转化，是植物基因工程研究的模式作物，技术重复性与稳定性更强。二、主流水稻基因转化方法目前水稻科研与规模化育种中，农杆菌介导法为主流方法，基因轰击法、PEG介导法、花粉管通道法为辅助转化方法，不同技术适配不同实验场景、受体材料与育种需求。（一）农杆菌介导转化法（主流）该方法是当前水稻育种、基因功能研究的技术，具有整合拷贝数低、遗传稳定、操作简便、成本低廉、转化等优势，适配绝大多数水稻籼稻、粳稻品种。
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