番茄基因转化-武汉贝科新肽公司

受体材料制备选取授粉后10–14天的玉米雌穗，剥离幼嫩籽粒，无菌条件下分离长度1.5–2.0mm的未成熟合子胚，去除胚轴，备用为转化受体。该时期幼胚分生能力，转化与再生效率。3. 农杆菌侵染与共培养将制备好的玉米幼胚浸入活化后的农杆菌侵染液，番茄基因转化，辅以短时离心、负压处理提升侵染效率；吸干多余菌液后，将幼胚置于共培养基上，22–25℃避光暗培养2–3天，实现T-DNA的转移与整合。


植株分化与生根培养将阳性胚性愈伤转入分化培养基，光照条件下培养，诱导芽体分化、幼苗生长；待幼苗长至3–5cm、具备完整茎叶结构后，转入生根培养基诱导根系生长，培系发达、长势健壮的完整组培苗。 炼苗移栽与分子鉴定打开组培瓶封口膜，室内炼苗3–5天，适应外界温湿度环境后，清洗根部培养基残渣，移栽至温室大田培养，获得T0代植株。提取植株基因组DNA，通过PCR、荧光定量PCR、Southern杂交鉴定外源基因整合与表达情况；收获T1及后代种子，连续自交筛选，获得遗传稳定的纯合株系。


新型辅助转化技术为突破传统技术瓶颈，近年行业广泛应用形态调控基因辅助转化技术，通过瞬时超表达Bbm、Wus2等胚胎发生调控基因，诱导玉米细胞直接体细胞胚胎发生，跳过愈伤组织诱导阶段，大幅突破基因型限制，显著提升骨干自交系的转化效率。同时，通过引入致死基因时空表达元件，可在后代中剔除辅助基因，避免其对玉米植株生长发育的影响，实现、安全的无标记转化。


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