






水稻组培是水稻基因转化的瓶颈与关键支撑技术,所有农杆菌介导的水稻阳性植株获得,完全依赖标准化、高稳定性的水稻组织培养体系。水稻组培是以成熟种子为起始材料,诱导胚性愈伤,再经过侵染筛选、分化、生根获得完整再生植株。相较于玉米,水稻组培体系更稳定、周期更短,但存在粳稻易成、籼稻难愈、褐化高发、假阳性频发等典型问题。本文聚焦实验水稻组培全流程,番茄组培,明确标准参数、关键要点与禁忌事项。

依托改造后的根癌农杆菌Ti质粒T-DNA转移系统,去除质粒致瘤基因,构建安全的二元载体、三元载体系统。将目的基因与筛选标记基因插入T-DNA区域,在农杆菌Vir毒蛋白的诱导作用下,T-DNA切割、转移并整合至水稻细胞核基因组,实现外源基因的稳定插入与表达。常用农杆菌菌株为EHA105、AGL-1,适配水稻愈伤组织侵染体系。
适用受体材料受体为水稻成熟种子诱导的胚性愈伤组织,材料获取不受季节、生育期限制,可全年开展转化实验;其次可选用水稻幼胚、幼穗诱导愈伤,再生能力更强,但取材受限。粳稻愈伤诱导与再生效率显著优于籼稻,籼稻是目前水稻转化的主要难点材料。
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