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1983年，外泌体在绵羊网织红细胞中被发现，1987年Johnstone将其正式命名为“exosome”，自此开启了外泌体研究的序幕。外泌体是细胞外囊泡（Extracellular Vesicles， EVs）的重要亚型，特指直径在30~150 nm之间（多数研究认为40~100 nm）、由细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体与细胞膜融合后释放到胞外基质中的盘状或球形小泡，其表面具有脂质双层膜结构，内部包裹着DNA、RNA、蛋白质、脂质、代谢物等多种生物活性分子。作为细胞间通讯的“信使”，外泌体能够将携带的生物活性 cargo 转运至，调控的生物学功能，参与机体免疫调节、组织修复和发展、神经退行性疾病进展等一系列生理病理过程，同时因其广泛存在于血液、唾液、尿液、脑脊液、等体液中，且具有来源广泛、稳定性强、特异性高的特点，被认为是极具潜力的疾病诊断生物标志物和递送载体。

生化标志物（蛋白 / 核酸 / 脂质）

蛋白标志物：

植物特有：TET8、PEN1、SYP121、HSP70等膜转运 / 热激蛋白。

通用：CD63/CD9/TSG101交叉反应弱，不推荐；优先 WB + 质谱。

核酸：小 RNA 测序、qPCR 检测 miRNA/sRNA；外泌体富集特定 RNA。

脂质：磷脂、鞘脂、胆固醇；质谱分析脂质组。

二、纯度与完整性检测

BCA+NTA：计算粒子 / 蛋白比（particles/mg），比值越高纯度越好。

Triton X?100 破膜实验：验证膜结构完整性；破膜后 NTA 颗粒数显著下降。

排除污染：检测叶绿体 / 线粒体标志物、多糖、多酚、果胶（植物样本易污染）。

TEM用于外泌体研究的实验流程主要包括样品制备、染色、电镜观察及图像分析四个步骤，其中样品制备是关键环节，外泌体检测服务，直接影响成像质量和结果准确性，具体流程如下：步，外泌体提取与纯化。首先从细胞培养液、、血浆、尿液等样本中提取外泌体，常用的提取方法包括离心法、密度梯度离心法、聚乙二醇沉淀法、超滤法、免疫磁珠法、排阻色谱法等，其中离心法是常用的方法，通过不同转速的离心，去除细胞碎片、大颗粒杂质及蛋白质 aggregates，获得相对纯化的外泌体沉淀。为了提高外泌体的纯度，提取后通常还需要进行二次离心或纯化处理，避免杂质对成像的干扰。需要注意的是，提取过程中应严格控制离心条件（转速、时间、温度），避免外泌体的膜结构被破坏，同时尽量避免反复冻融，防止外泌体形态发生改变。



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