冷冻透射电镜（cryo-TEM）无需化学固定与染色，将样品快速浸入液态玻璃化冷冻，在液氮温度下成像；能保留外泌体天然结构（膜、内部成分），适合高分辨率三维重构（冷冻电子断层扫描 cryo-ET）；缺点是设备昂贵、样品制备门槛高。
超薄切片 TEM外泌体经 / 双固定、脱水、树脂包埋后，切成 40–90 nm 超薄切片，染色后观察；适合观察细胞内多囊体释放外泌体的原位结构，或外泌体群体的内部细节。
扫描电镜（SEM）电子束扫描样品表面成像，主要看外泌体在基底上的分布与表面形貌；需喷金导电处理，分辨率略低于 TEM，外泌体zeta电位测试，不适合观察内部膜结构。
外泌体的尺寸微小（30~150 nm），传统光学显微镜无法清晰呈现其形态和结构，而电子显微镜技术通过电子束替代可见光，利用电子的波动性和粒子性，实现了纳米级的分辨率，能够直观、清晰地展示外泌体的超微结构，是外泌体形态学鉴定和结构分析的工具。目前，用于外泌体研究的电镜技术主要包括透射电镜、扫描电镜、冷冻透射电镜、电子断层扫描及免疫电镜等，各类技术的原理、特点及应用场景存在显著差异，下面分别进行详细阐述。
标准检测流程（推荐）
样本前处理：收集质外体液 / 汁液，过滤（0.45/0.22 μm），去多糖 / 多酚 / 果胶。
分离纯化：差速离心→密度梯度离心 / 尺寸排阻 / 超滤→浓缩。
鉴定：
TEM：形态 + 粒径
NTA：粒径分布 + 浓度
WB / 质谱：标志蛋白
核酸 / 脂质分析
纯度验证：粒子 / 蛋白比、破膜实验、污染标志物检测。
功能验证：细胞摄取、活性、 / 抗病等。
五、质控与合规（如 FDA DMF）
纯度、粒径 / 浓度、形态、蛋白 / 核酸 / 脂质组成、稳定性、生物活性、安全性（细胞毒性）、抗原性。
植物外泌体检测难点
植物样本含大量多糖、多酚、果胶、细胞壁碎片，易共沉淀，干扰检测。
缺乏广谱、高特异性植物外泌体，标志物鉴定受限。
提取量极低（1 kg 样本≈μg 级），需高灵敏度方法。
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