






主流电镜技术与流程
传统透射电镜(负染 TEM,常用)
样品制备:纯化外泌体悬液(离心 + 0.22 μm 过滤),滴至 Formvar / 碳膜铜网吸附(5–30 min);2% 预固定,再用 1–2% 醋酸铀(UA)或 2% 磷钨酸(PTA,pH 6.5–7.0)负染(0.5–2 min),吸干后室温干燥。
成像参数:加速电压 80–120 kV,放大倍数 50,000–100,000×,低剂量模式避免样品损伤。
典型图像:双层膜清晰,呈亮边暗背景的杯状 / 圆形,直径符合 30–150 nm 范围;盐结晶为规则几何形、细胞碎片不规则,需排除。
植物外泌体(植物源外泌体样纳米颗粒,PELNs)检测以形态、粒径、浓度、生化组成、纯度为,优先用TEM+NTA+WB / 质谱组合鉴定,再做功能与质控检测。
一、鉴定三要素(ISEV 标准)
1. 形态学观察(TEM/SEM/AFM)
透射电镜(TEM):金标准,可见双层膜、杯状 / 茶托状、近球形结构,粒径 30–150 nm。
扫描电镜(SEM):看表面形貌与分散性。
原子力显微镜(AFM):测三维形貌与膜厚度。
2. 粒径与浓度(NTA/DLS)
纳米颗粒跟踪分析(NTA):单颗粒,给出粒径分布(30–150 nm 为主)、浓度、多分散性,适合复杂样本。
动态光散射(DLS):测平均粒径与 PDI,适合单分散体系,不能替代 NTA。
合格参考:主峰 30–150 nm,浓度≥1×10? particles/mL。

外泌体内容物(核酸、蛋白质等)的检测是挖掘其临床价值的关键,传统检测技术以单一标志物检测为主,新兴技术则朝着多重检测、高灵敏度、高通量的方向发展。传统核酸检测技术包括实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、逆转录PCR(RT-PCR)等,可检测外泌体中miRNA、mRNA等核酸的表达水平,操作相对简便、成本较低,但存在操作繁琐、灵敏度不足、无法实现多重检测等局限,外泌体检测服务,且需裂解外泌体提取核酸,可能导致核酸丢失与降解。蛋白质检测技术除WB、ELISA外,还包括蛋白质芯片技术,可同时检测多种蛋白质标志物,但灵敏度有待提升。
贝科新肽(多图)-武汉外泌体检测服务由武汉贝科新肽科技有限公司提供。武汉贝科新肽科技有限公司坚持“以人为本”的企业理念,拥有一支高素质的员工队伍,力求提供更好的产品和服务回馈社会,并欢迎广大新老客户光临惠顾,真诚合作、共创美好未来。贝科新肽——您可信赖的朋友,公司地址:武汉市洪山区雄楚大道339号林业局林木种苗管理总站科技楼6楼606,联系人:夏先生。